療效研究
益智康腦丸成分中肉從蓉總甙對小鼠組織的抗氧化作用
日期:2012-12-27 10:48
王曉雯 李琳琳 木胡牙提 王雪飛 堵年生
摘要目的:研究肉歡蓉總試 ( GCS)對小鼠組織的抗氧化作用。方法:采用鄰苯三酚自氧化、硫代巴比妥酸;TBA)和熒光法.分別測定小鼠心、肝、腦、腎組織中SOD活性、MDA及脂褐質含量。結果:GCS(125mg
關鍵詞:肉蓯蓉總甙 超氧化物歧化酶 丙二醛 脂褐質 抗氧化
肉從蓉Cistanch.e salsa(c. A. IVIey.)G.Beck.有補中益氣,益精,壯陽之功效,在歷代抗老延年古方中出現的機率僅次于人參。近代藥理研究,肉從蓉有增強機體免疫功能[1],促進記憶,提高智能[2],抗衰老[3]等作用。肉從蓉粗制劑顯著降低心肌脂褐質含量[3]。本文主要研究肉灰蓉總貳( GcS)對小鼠心、肝、腦、腎組織的抗氧化作用及脂褐質含量的影響。
1材料
1.1藥材及試劑肉從蓉總貳由新疆醫學院藥學系植化室提取并鑒定[4]。鄰苯三酚。遵義
市第二化工廠生產;硫代巴比妥酸,上海試劑二廠生產;奎寧,上海試劑二廠;1, 1, 3, 3-四乙氧基烷(TEP)??捡R斯亮藍均為Sigma公司產品。
1.}動物VIH種小鼠,由新疆地方病研究所動物實驗中心提供。
2方法與結果
Z.1 GCS對小鼠組織中5QD活性及MDA含量的影響選5月齡i}1IH健康小鼠40只,體重(33.5 1 2)g,雌雄兼用,依體重均衡隨機分成生理鹽水對照組〔NS)和不同劑量GCS組(62 .5, 125* 250mg·kg-1·d-1,ig ),連續30d;
另設1月齡NIH幼年小鼠10只,體重(15.2士1.5)g,ig同體積NS,每天1次,連續30d,各組于末次給藥后1.5h,脫頸椎處死,開胸腹,立即取出心、肝、腦、腎組織,用冷凍NS沖洗,組織稱重,研磨,制備組織勻漿,3000r " min-離心30min-1,取其上清液備測,采用鄰苯三酚自氧化法測定組織SOD活性[5].用TBA顯色法測組織MDA含量[6].用考馬斯亮藍法測定組織蛋白[7]。
結果表明5’月齡NS組小鼠心、肝組織中SOD活性明顯低于1月齡NS組,各組織MDA含量明顯高于1月齡NS組,GCS組與5月齡NS組比較,250mg " kg一‘時顯著提高心、肝組織中”D活性,接近1月齡組;125, 250mg " kg一’組均降低心、肝組織中MDA含量,接近1月齡組:125, 250mg " kg”組顯著提高腦、腎組織中SOD活性,并顯著降低MDA含量,接近1月齡組(表1}
a . z Gcs對小鼠組織脂褐質含量的影響選健康5月齡NIH種小鼠as只,體重(3211.5)g,雌雄兼用,依體重均衡分成4組,:VS對照組和不同劑量GCS組(62. 5, 125, 250mg " kg一‘·d一 1, ig),連續30d,另設1月齡NIH種小鼠la只,體重〔151 1. 5)g,啥同體積NS,每天1次,連續Sad,各組于末次給藥后1.5h,脫頸椎處死,分別取心、肝、腦、腎組織,用濾紙吸干水分,稱取各組織0.2g,按Sohal}$]方法,將組織用氯仿.甲醇X2:1)混合液分次制成8m1勻漿,置40℃水浴溫育Smin, 3000r " min一‘離心14min,取氯仿層于島津RF-540型熒光分光光度儀,激發波長352 . 6nm,發射波長451. Lnm,測熒光強度,按硫酸奎寧卜g"ml-‘的熒光強度為I00單位,計算每克濕組織的熒光計數單位,以u"g一‘表示。
結果見表2,各組均與5月齡小鼠IV5組比較,1月齡IBS組,肝、腦組織中脂褐質含量明顯低于5月齡NS組。GC5 250mg " kg‘組明顯降低心臟組織中脂褐質含量,125.250mg " kg-1時均明顯降低肝、腎組織中脂褐質含量,250mg kg一‘時降低更明顯。
3討論
衰老的自由基學說認為,隨著增齡,體內自由基的產生與消除失平衡,使自由基清除酶SOD活性降低,使生物膜發生脂質過氧化,破壞了生物大分子的結構和功能,使體內主要臟器心、肝、腦、腎等受損。另外,脂褐質是自由基氧化作用的產物,其在組織內含量與脂質過氧化反應呈正相關,是衰老的一項指標。因此,維持體內自由基的穩態和平衡,消除有害的自由基反應,中斷脂質過氧化,減少脂質過氧化產物,對延緩衰老十分重要,這有賴于提高自由基清除酶系統活性。目前研究認為多數中藥的抗衰老作用機制可能與其抗氧化作用有關[9]。本文研究發現肉從蓉中的有效成分肉從蓉總貳能明顯提高5月齡小鼠心、肝、腦、腎組織中自由基清除酶SOD活性,對腦、腎組織作用敏感。并降低上述組織中11}iDA及脂褐質含量。提示GCS具有抗氧化作用及抗衰老作用。