療效研究
肉蓯蓉抗氧化作用及對超氧化物歧化酶活性的影響
日期:2012-12-26 15:34
謝繼紅 吳春福 鄒宇宏 劉雯 高集馥
(大連醫藥科學研究所116013,沈陽藥學院中藥藥理教研室11.0015)
提要肉蓯蓉乙醇提取物在體外溫育體系中能顯著抑制大鼠腦、肝、心、腎}爭丸組織勻漿過氧化脂質的生成,并呈現良好的量效關系。體內實驗中,該提取物100, 200mg/kg/ 日,連續灌胃40天,僅對大鼠大腦皮層過}L化脂質生成有顯著抑制作用,時其它組織無明顯影響,200mg/kg/日灌胃15天,時大鼠血漿超氧化物歧化酶活性有顯著增強作用。
關鍵詞肉蓯蓉;抗脂質過氧化;超氧化物歧化酶
肉蓯蓉屬補益強壯中藥。藥理研究表明肉歡蓉能增強動物的免疫功能[1],調節下丘腦一垂體一性腺軸功能[2],對陽虛動物DNA合成有一定促進作用[3]。近年來國內許多學者研究了補益中藥的抗過氧化及抗衰老作用[4,5],然而在此方面有關肉蓯蓉的研究尚未見報道。為了探討肉蓯蓉補益強壯機理,本文用體外和體內方法研究了它對大鼠不同組織過氧化脂質生成的作用,并研究了它對大鼠血漿超氧化物歧化酶活性的影響。
材料
動物Sprague-Dawley種大鼠,雌雄兼用,體重180~200g,由沈陽藥學院實驗動物室提供。
藥品肉獲蓉(Cistanche deserticola Y.C.Ma)購自內蒙古赤峰市藥材公司,生藥由沈陽藥學院植物教研室孫啟時副教授鑒定。取生藥粉碎后,用70%乙醇提取,回收乙醇,干燥后得樣品。硫代巴比妥酸為上海試劑二廠產品,四乙氧基丙烷為瑞士Fluka產品,超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒購自海軍總醫院分子生物學研究室。
方法與結果
體外肉眾蓉對大鼠不同組織過妞化脂質生成的影響取大鼠斷頭處死,迅速取出心、腦、肝、腎、辜丸組織,分別制成5%組織勻漿生理鹽水液。每只試管中加入不同濃度的肉蓯蓉液0.1m1,與組織勻漿共同溫育1.5小時。參照Riely的方法[67,用硫代巴比妥酸顯色,532nm處測OD值。以四乙氧基丙烷為標準計算每克組織過氧化脂質的生成量。結果表明,肉歡蓉對體外溫育條件下不同組織勻漿過氧化脂質的生成均有顯著的抑制作用,且隨藥物濃度增加,過氧化脂質生成量減少,呈現良好的量效關系(表1)。
體內肉眾蓉對大鼠不同組織過妞化脂質生成的取大鼠42只,雌雄各半,隨機分為3組,每組14只。給藥組分別灌胃肉蓯蓉提取物50, 100mg/kg,每日二次;對照組灌胃等容量生理鹽水。
于給藥15天后,各組取一半動物,參照R iely的方法[6]測定大腦皮層、心、肝、腎組織中過氧化脂質含量。余下動物繼續給藥,40天后同前處理,測定過氧化脂質含量(表2)。
由表2可見,連續灌胃給予肉蓯蓉15天,對大鼠各組織過氧化脂質生成沒有顯著影響;給藥40天,對大鼠大腦皮層過氧化脂質生成呈顯著抑制作用,而對其它組織沒有顯著影響。
對大鼠血槳SOD活性的影響取大鼠21只,雌雄兼用,隨機分為3組,每組7只。給藥組分別灌胃肉蓯蓉提取物50, 100mg/kg,每日二次,對照組灌胃等容量生理鹽水,連續15天。停藥后第二天,將大鼠斷尾采血0.7m1,肝素抗凝,1500rpm離心6min,制備血漿,按亞硝酸法[7]測定SOD活性。結果以亞硝酸單位/ml表示SOD活性,生理鹽水組為77.0士8.6,肉蓯蓉100mg/kg/日組為80.9士11.6 , 200mg/kg/日組為87.4士5.7。結果表明肉蓯蓉200mg/kg/日組可顯著增強大鼠血漿中SOD活性((P<0.05)。
討論
本實驗結果表明,肉蓯蓉乙醇提取物在體外反應體系中抗脂質過氧化作用的最小有效濃度為60µg/ml,隨藥物濃度增加藥效相應增強;體內給藥40天顯著抑制大鼠大腦皮層過氧化脂質的生成。文獻報道[8],肉蓯蓉中的成分之一京尼平酸(genipo-sidic acid)是一種非常強的抗氧劑,肉蓯蓉甙類是一族含有兒茶酚結構的化合物[9,10],已們也極易被氧化,提示肉蓯蓉自身具有抗氧化作用。本實驗還發現肉蓯蓉乙醇提取物對大鼠血漿SOD活性有促進作用,表明它對機體自由基防御酶也有激活作用,蓯另一方面起到抑制脂質過氧化,防止組織損傷的作用。
一般認為,具有清除自由基、抑制脂質過氧化的藥物,在一定程度上可以防治疾病、延緩衰老。
本研究結果為肉蓯蓉的補益強壯作用提供了一定的實驗依據。